供氧不足減產,過量又浪費?搞懂微生物需氧的因素
微生物的需氧量由其自身的遺傳特性、生理狀態(菌齡)、代謝路徑(如TCA或EMP)以及外部的培養基成分和培養條件共同動態決定。
疣孢漆斑霉在分批發酵時呼吸強度的變化情況
分批發酵過程中,微生物細胞耗氧的一般規律如上圖所示。由圖分析可知:
在培養初期,呼吸強度Qo?逐漸增高,此時菌體濃度很低;在對數生長期初期,呼吸強度就達到了最大值即(Q9?)m,但此時菌體濃度還較低,因此,發酵液的攝氧率并不高;隨著微生物細胞濃度在對數生長期迅速增高,發酵液的攝氧率也迅速增高,并在對數生長期的后期達到最大值,此時的呼吸強度略低于其最大值,且菌體還在生長,此時的菌體濃度也低于其最大值;在對數生長期末,由于發酵液中營養物質的消耗帶來的底物限制以及代謝產物的抑制作用,細胞活力已經下降,同時,發酵罐的氧傳遞能力因受菌體濃度大量增加等的影響也在下降,所以,呼吸強度明顯下降,雖然這時的菌體濃度仍有增加甚至達到了最大值,但發酵液的攝氧率已出現下降;到發酵后期,因基質耗盡,細胞出現自溶,呼吸強度進一步下降,攝氧率也隨之迅速下降。
以上所述的只是呼吸強度和攝氧率變化的一般規律,這一規律通常還要受到以下因素的限制和影響。
(1)微生物遺傳特征的影響
不同種類微生物的耗氧量不同,一般為25~100 mmol O?/(L·h),但也有少數微生物很高。同一種微生物的耗氧量,隨著菌齡和培養條件不同而異。菌體生長和大量形成代謝產物時的耗氧量也往往不同。
根據文獻資料,工業液體有氧發酵的通氣量一般范圍通常在 0.5 到 2.0 vvm 之間,我們可以反推出空氣中的氧氣利用率10%~15%(受多因素影響,該值為大致估算值)。
(2)培養基成分和濃度的影響
培養基成分尤其是碳源種類對微生物細胞的耗氧量有很大影響,且培養基濃度也會影響細胞的耗氧速率。在細胞適應的濃度范圍內,培養基濃度越大,細胞代謝越旺盛,耗氧增加;反之亦然,如碳源成為限制性基質時,細胞呼吸強度下降明顯,當補充碳源后,呼吸強度又迅速上升。此外,若培養基中含有生長抑制劑時,呼吸強度也會受到抑制。
(3)菌齡
從細胞個體的角度看,一般幼齡菌體生長旺盛,呼吸強度大,老齡菌生長慢,呼吸強度較小。
(4)培養條件
pH、溫度等因素通過影響菌體的酶活性而影響到菌體的呼吸強度,而且溫度還會通過改變發酵液中溶解氧濃度來影響菌體的呼吸強度。
(5)代謝類型
若產物是通過三羧酸循環(TCA)產生,則代謝旺盛,呼吸強度高,需氧量大;若產物是通過糖酵解途徑(EMP)產生,則代謝較弱,呼吸強度低,耗氧量小。
在工業發酵生產中,生產TCA循環相關產物(如檸檬酸、氨基酸),必須配備強大的供氧系統(高效攪拌、高通氣量)。生產EMP途徑產物(如乳酸、酒精),則需嚴格控制低溶氧甚至無氧環境。
需注意在TCA循環主導的過程中,如果溶氧(DO)突然急劇上升,往往意味著細胞呼吸減弱,TCA循環可能受阻(如營養耗盡、中毒),是重要的異常信號。
這些影響微生物需氧的核心因素,共同編織成發酵過程中動態變化的耗氧邏輯:從菌種自身的遺傳特性與菌齡節律,到培養基的“代謝驅動力”,再到環境條件與代謝路徑的底層約束,每一環都在左右著耗氧曲線的走向。這也意味著工業生產中“固定供氧”的思路不可取,必須以動態、精準的策略適配菌體的實時需求。
溶解氧(DO)濃度是這場調控的“指揮棒”:它的異常波動對應著不同的生產信號——DO異常時,需優先排查對數生長期的群體耗氧、基質供給或環境參數;而TCA途徑產物生產中DO異常升高,可能是代謝受阻的影響。通過緊盯這一指標,生產人員能快速定位問題,及時調整操作。
說到底,高效的發酵生產,正是在理解微生物“需氧規律”的基礎上,用通氣、攪拌、補料等手段,為菌體的生長代謝適配恰到好處的氧氣。讓供氧節奏與菌體的生長、產率需求同頻,才能實現高產、穩產與低成本的工業目標。


